جداسازی و همسانه‏سازی ژن رمزگردان pgip (polygalacturonase inhibiting protein) از گیاه خربزه وحشی (cucumis melo var. agrestis) و انتقال آن به آرابیدوپسیس

پایان نامه
چکیده

یکی از مشکلات تولید محصولات جالیزی بخصوص گیاهان خانواده کدوئیان خسارت بالای پاتوژن‏های قارچی است که استفاده بی‏رویه از سموم را در پی داشته است. از طرفی بعضی از خویشاوندان وحشی خانواده کدوئیان مقاومت خوبی را در تقابل با انواع پاتوژن‏ها بروز داده‏اند و می‏توان از آنها به عنوان ذخایر ژنتیکی برای اصلاح گیاهان زراعی حساس بهره برد. در این پژوهش توالی‏های ژنی کد‏کننده ژن رمزگردان (pgip (polygalacturonase inhibiting protein از خربزه وحشی (cucumis melo var. agrestis) جداسازی شد. برای این کار از dna ژنومی و cdna سنتز شده از rna کل به عنوان الگو برای جداسازی توالی مورد نظر استفاده شد. پس از بررسی‏های بیوانفورماتیکی روی توالی‏های مشابه موجود در بانک ژن، پرایمرهای دقیق و دژنره از توالی‏های اجماعی طراحی شدند و توالی‏های مذکور پس از تکثیر با pcr در وکتورهای ta همسانه‏سازی و توالی‏یابی شدند. در مرحله بعد پرایمرهای حاوی سایت برشی xbai و saci طراحی شدند و قطعات ژنی پس از تکثیر مجدد در وکتورهای دوتاییpbi121 همسانه‏سازی و پس از بررسی‏های اولیه و اطمینان از صحت آنها، به اگروباکتریوم نژاد gv3101 منتقل شدند. گیاهان آرابیدوپسیس با اگروباکتریوم‏ها تلقیح و گیاهان تراریخت در محیط انتخابی گزینش شدند. سپس این گیاهان با روش‏های pcr و rt-pcr ارزیابی شدند. نتایج نشان داد با استفاده از هر دو نوع الگوی dna ژنومی و cdna، قطعه ژنی به طول 981 جفت باز که شامل orf کامل ژن pgip بود، ایجاد شد که نشان‏دهنده عدم وجود اینترون در ژن مذکور بود. آزمون pcr گیاهان انتخابی نشان داد که این گیاهان ژن pgip را دریافت کرده‏اند و آزمون rt-pcr بیانگر نسخه‏برداری این ژن در اکثر لاین‏های تراریخت بود. بررسی‏های اولیه نشان داد تغییرات مورفولوژیک یا فیزیولوژیک خاصی در گیاهان تراریخت ایجاد نشده است و نمو آنها مشابه گیاهان شاهد غیر تراریخت بوده است. خربزه وحشی، pgip، گیاه تراریخت، آرابیدوپسیس، جداسازی ژن

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ارزیابی تنوع ژنتیکی و ساختارشناسی توده‌های خربزه وحشی (Cucumis melo var. agrestis) حاشیه جنوبی دریای خزر با استفاده از نشانگرهای مولکولی AFLP

Abstract      Wild melon (Cucumis melo var. agrestis) commonly known as African melon grows in tropical and semi tropical regions of the world. It also known as a valuable medicinal plant has numerous pharmaceutical properties and is considered as a valuable germplasm in cultivated melons breeding. In the present study, genetic variation of sixteen wild melons, collected from Mazandaran provin...

متن کامل

Influence of environmental factors on Cucumis melo L. var. agrestis Naud. seed germination and seedling emergence

Cucumis melo L. var. agrestis Naud. (field muskmelon) is an annual invasive weed in many parts of Asia. However, there is very little available information about the germination and emergence of this species. Therefore, laboratory experiments were conducted to evaluate the effects of light, temperature, salt stress, osmotic stress, pH, and depth of planting on field muskmelon germination and se...

متن کامل

Reproductive biology of the andromonoecious Cucumis melo subsp. agrestis (Cucurbitaceae).

BACKGROUND AND AIMS Cucumis melo subsp. agrestis (Cucurbitaceae) is cultivated in many African regions for its edible kernels used as a soup thickener. The plant, an annual, andromonoecious, trailing-vine species, is of high social, cultural and economic value for local communities. In order to improve the yield of this crop, the first step and our aim were to elucidate its breeding system. M...

متن کامل

De Novo Transcriptome Analysis of Cucumis melo L. var. makuwa

Oriental melon (Cucumis melo L. var. makuwa) is one of six subspecies of melon and is cultivated widely in East Asia, including China, Japan, and Korea. Although oriental melon is economically valuable in Asia and is genetically distinct from other subspecies, few reports of genome-scale research on oriental melon have been published. We generated 30.5 and 36.8 Gb of raw RNA sequence data from ...

متن کامل

ترکیبات شیمیایی، تولیدگاز و قابلیت هضم بخش‌های مختلف گیاه خربزه (L. Cucumis melo)

پژوهشی با هدف تعیین ارزش غذایی بخش‌های مختلف گیاه خربزه (50 روز پس از کاشت) شامل برگ، گیاه کامل، گل و میوۀ نارس در مقایسه با یونجه کامل (به عنوان شاهد) با تکنیک تولید گاز و روش‌های رایج آزمایشگاهی در قالب طرح کاملاً تصادفی انجام شد. دامنۀ تغییرات ماده خشک، پروتئین‌خام، خاکستر، الیاف نامحلول در شویندۀ ‌اسیدی، الیاف نامحلول در شویندۀ خنثی و چربی خام برای بخش‌های مختلف گیاه خربزه به‌ترتیب 06/11-71/...

متن کامل

Characterization of the dry bean polygalacturonase-inhibiting protein (PGIP) gene family during Sclerotinia sclerotiorum (Sclerotiniaceae) infection.

Polygalacturonase-inhibiting proteins are leucine-rich repeat proteins that inhibit fungal endopolygalacturonases. The interaction of polygalacturonase-inhibiting protein with endopolygalacturonases limits the destructive potential of endopolygalacturonases and may trigger plant defense responses induced by oligogalacturonides. We examined the expression of fungal pg and plant Pvpgip genes in b...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری - دانشکده کشاورزی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023