جداسازی و همسانهسازی ژن رمزگردان pgip (polygalacturonase inhibiting protein) از گیاه خربزه وحشی (cucumis melo var. agrestis) و انتقال آن به آرابیدوپسیس
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری - دانشکده کشاورزی
- نویسنده شقایق جدی یزدان آباد
- استاد راهنما علی دهستانی کلاگر حمید نجفی زرینی
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1391
چکیده
یکی از مشکلات تولید محصولات جالیزی بخصوص گیاهان خانواده کدوئیان خسارت بالای پاتوژنهای قارچی است که استفاده بیرویه از سموم را در پی داشته است. از طرفی بعضی از خویشاوندان وحشی خانواده کدوئیان مقاومت خوبی را در تقابل با انواع پاتوژنها بروز دادهاند و میتوان از آنها به عنوان ذخایر ژنتیکی برای اصلاح گیاهان زراعی حساس بهره برد. در این پژوهش توالیهای ژنی کدکننده ژن رمزگردان (pgip (polygalacturonase inhibiting protein از خربزه وحشی (cucumis melo var. agrestis) جداسازی شد. برای این کار از dna ژنومی و cdna سنتز شده از rna کل به عنوان الگو برای جداسازی توالی مورد نظر استفاده شد. پس از بررسیهای بیوانفورماتیکی روی توالیهای مشابه موجود در بانک ژن، پرایمرهای دقیق و دژنره از توالیهای اجماعی طراحی شدند و توالیهای مذکور پس از تکثیر با pcr در وکتورهای ta همسانهسازی و توالییابی شدند. در مرحله بعد پرایمرهای حاوی سایت برشی xbai و saci طراحی شدند و قطعات ژنی پس از تکثیر مجدد در وکتورهای دوتاییpbi121 همسانهسازی و پس از بررسیهای اولیه و اطمینان از صحت آنها، به اگروباکتریوم نژاد gv3101 منتقل شدند. گیاهان آرابیدوپسیس با اگروباکتریومها تلقیح و گیاهان تراریخت در محیط انتخابی گزینش شدند. سپس این گیاهان با روشهای pcr و rt-pcr ارزیابی شدند. نتایج نشان داد با استفاده از هر دو نوع الگوی dna ژنومی و cdna، قطعه ژنی به طول 981 جفت باز که شامل orf کامل ژن pgip بود، ایجاد شد که نشاندهنده عدم وجود اینترون در ژن مذکور بود. آزمون pcr گیاهان انتخابی نشان داد که این گیاهان ژن pgip را دریافت کردهاند و آزمون rt-pcr بیانگر نسخهبرداری این ژن در اکثر لاینهای تراریخت بود. بررسیهای اولیه نشان داد تغییرات مورفولوژیک یا فیزیولوژیک خاصی در گیاهان تراریخت ایجاد نشده است و نمو آنها مشابه گیاهان شاهد غیر تراریخت بوده است. خربزه وحشی، pgip، گیاه تراریخت، آرابیدوپسیس، جداسازی ژن
منابع مشابه
ارزیابی تنوع ژنتیکی و ساختارشناسی تودههای خربزه وحشی (Cucumis melo var. agrestis) حاشیه جنوبی دریای خزر با استفاده از نشانگرهای مولکولی AFLP
Abstract Wild melon (Cucumis melo var. agrestis) commonly known as African melon grows in tropical and semi tropical regions of the world. It also known as a valuable medicinal plant has numerous pharmaceutical properties and is considered as a valuable germplasm in cultivated melons breeding. In the present study, genetic variation of sixteen wild melons, collected from Mazandaran provin...
متن کاملInfluence of environmental factors on Cucumis melo L. var. agrestis Naud. seed germination and seedling emergence
Cucumis melo L. var. agrestis Naud. (field muskmelon) is an annual invasive weed in many parts of Asia. However, there is very little available information about the germination and emergence of this species. Therefore, laboratory experiments were conducted to evaluate the effects of light, temperature, salt stress, osmotic stress, pH, and depth of planting on field muskmelon germination and se...
متن کاملReproductive biology of the andromonoecious Cucumis melo subsp. agrestis (Cucurbitaceae).
BACKGROUND AND AIMS Cucumis melo subsp. agrestis (Cucurbitaceae) is cultivated in many African regions for its edible kernels used as a soup thickener. The plant, an annual, andromonoecious, trailing-vine species, is of high social, cultural and economic value for local communities. In order to improve the yield of this crop, the first step and our aim were to elucidate its breeding system. M...
متن کاملDe Novo Transcriptome Analysis of Cucumis melo L. var. makuwa
Oriental melon (Cucumis melo L. var. makuwa) is one of six subspecies of melon and is cultivated widely in East Asia, including China, Japan, and Korea. Although oriental melon is economically valuable in Asia and is genetically distinct from other subspecies, few reports of genome-scale research on oriental melon have been published. We generated 30.5 and 36.8 Gb of raw RNA sequence data from ...
متن کاملترکیبات شیمیایی، تولیدگاز و قابلیت هضم بخشهای مختلف گیاه خربزه (L. Cucumis melo)
پژوهشی با هدف تعیین ارزش غذایی بخشهای مختلف گیاه خربزه (50 روز پس از کاشت) شامل برگ، گیاه کامل، گل و میوۀ نارس در مقایسه با یونجه کامل (به عنوان شاهد) با تکنیک تولید گاز و روشهای رایج آزمایشگاهی در قالب طرح کاملاً تصادفی انجام شد. دامنۀ تغییرات ماده خشک، پروتئینخام، خاکستر، الیاف نامحلول در شویندۀ اسیدی، الیاف نامحلول در شویندۀ خنثی و چربی خام برای بخشهای مختلف گیاه خربزه بهترتیب 06/11-71/...
متن کاملCharacterization of the dry bean polygalacturonase-inhibiting protein (PGIP) gene family during Sclerotinia sclerotiorum (Sclerotiniaceae) infection.
Polygalacturonase-inhibiting proteins are leucine-rich repeat proteins that inhibit fungal endopolygalacturonases. The interaction of polygalacturonase-inhibiting protein with endopolygalacturonases limits the destructive potential of endopolygalacturonases and may trigger plant defense responses induced by oligogalacturonides. We examined the expression of fungal pg and plant Pvpgip genes in b...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری - دانشکده کشاورزی
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023